一步法RT-qPCR試劑盒

Biomarker One Step SYBR Green RT-qPCR Kit

目錄：RK02012

規格：250 RXN (20 μL/RXN)

運輸方式：干冰運輸。

保存方式：-20?℃避光保存，本產品避免反復凍融。

百邁客推出的一步法RT-qPCR試劑盒（Biomarker?One Step SYBR Green RT-qPCR Kit），實現在同一個管中，一步完成從反轉錄到定量PCR的全部反應。以RNA為模板，使用基因特異性引物，在BiomarkerScript?II One Step Enzyme Mix作用下，高效合成第一鏈cDNA。再以cDNA為模板，在2×One Step SYBR Green RT-qPCR?Buffer作用下，配合優化的緩沖體系（緩沖體系中添加了有效抑制非特異性PCR擴增的組分和提高擴增能力的促進因子），對高/低豐度的目的基因進行精準定量擴增，該試劑盒重復性好，可信度高。

圖1：不同儀器所需ROX Reference Dye不同，請參考上述機型。

（以下RNA模板，均是用百邁客微量動物組織RNA提取試劑盒提取）

1.靈敏度檢測：均以小鼠肝臟RNA為模板，設置不同的濃度梯效率可達99.1%，10 pg的RNA模板也完全可以擴增。

圖2：以10 μg-10?pg小鼠肝臟總?RNA為模板，擴增?GAPDH基因。結果發現：線性范圍可達7個數量級，靈敏度可達?10?pg測分析。

2.重復性檢測：分別設置30個復孔，擴增相同的基因，發現擴增曲線的Ct值幾乎一致。

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圖3：以100 ng小鼠肝臟總?RNA為模板，設置30個復孔，擴增β-actin基因，擴增重復率高。

3.物種多樣性檢測：分別以多種動、植物的RNA為模板，進行定量分析。發現所有的樣本對應的目的完全片段，均成功擴增出來。

圖4：物種多樣性檢測：分別以不同物種、不同濃度的RNA為模板，進行一步法RT-qPCR擴增。包括人肝癌（藍色）；果蠅（綠色）；小鼠腸道（黑色）；番茄果（紅色）；日本水稻（紫色）；辣椒（橙色）；石斑魚（灰色）。