PCR試劑盒

Biomarker HS 2X HF Master Mix

目錄: RK02006

規格: 50 RXN

濃度: 2X

該試劑盒包含 HiFi DNA聚合酶、dNTPs、反應緩沖Buffer、優化的MgCl₂溶液，該預混液中僅需加入DNA模板、引物和水即可進行擴增。該預混液主要針對多樣性模板，對如動物、植物、cDNA等均有較好的擴增效率。

運輸方式：干冰運輸。

保存方式：-20 °C避光保存。

• 高保真性和優異的擴增性能

Biomarker HS DNA聚合酶是一種全新的類似Pyrococcus furiosus來源的突變酶，具有獨特的結構，融合了持續合成增強結構域，提高了保真度和延伸速度。保真度比Pyrococcus furiosus?DNA聚合酶高6倍。

• 樣本兼容性強，適合動物、植物、質粒等樣本

優化的緩沖體系，適用于人、雞、昆蟲、質粒、玉米、水稻、番茄、擬南芥等樣本。

圖1：使用Biomarker HS DNA聚合酶，分別以人、雞、小鼠、昆蟲、質粒、玉米、水稻、番茄的全基因組DNA為模板，擴增長度分別為628?bp、 2.5 kb、1750?bp、750 bp、549 bp、300 bp、1.5 kb、1.2 kb的目標片段。所有片段均可以實現高特異性、高產量擴增。M：250 bp DNA Marker。

• 適用于不同GC%含量片段的擴增

圖2：使用Biomarker HS DNA聚合酶，對不同GC含量（35%~65%）片段都可實現高質量的擴增。M：250 bp DNA Marker。

• 靈敏度高，可擴增低至10 pg的模板

圖3：使用Biomarker HS DNA聚合酶，以不同模板量（10 pg、100 pg、1 ng、10 ng、500 ng）人基因組DNA為模板，擴增 628 bp的目的片段，發現不同模板量都可有效擴增。M：250 bp DNA Marker。

• 特異性強，可擴增10 kb以上的目的片段

Biomarker HS DNA聚合酶添加了能夠抑制酶活性的單克隆抗體，可進行高特異性的熱啟動PCR。

圖4：使用Biomarker HS DNA聚合酶，以不同基因組DNA為模板，擴增長度分別為549 bp、628?bp、1750?bp、2.5 kb、?5 kb、10 kb、13 kb的目的片段。所有片段均可以實現高特異性、高產量擴增。M：λ-Hind Ⅲ DNA?Marker。

1.常規PCR（包含動物，植物等多種模板）

2.菌落PCR（直接菌落PCR，沒有任何抑制作用）

3.長片段擴增（人基因組最長可達到23kb）

4.16S rDNA鑒定

5.cDNA（條帶單一，50?ng Total RNA投入量獲得的cDNA即可作為模板）

Q1：逆轉錄后的產物cDNA作為模板，每次加多少體積？

A1：如果DNA模板是從cDNA合成反應中獲得的，則添加的體積應小于總反應體積的10%。若擴增長片段，可適當增加模板投入量。

Q2：擴增完的產物是平末端還是黏性末端？

A2：高保真酶擴增完的都是平末端產物。

Q3：出現非特異性擴增，要如何改善？

A3：1) 引物：引物自身形成二聚體，或者引物與靶序列有非特異性互補。建議重新優化設計引物；

2) 模板：模板量過高或者降解，使用量建議參考說明書。以及模板被污染，建議凝膠電泳檢測模板純度以及完整性。

3) 反應程序不夠優化：若雜帶比目的條帶小，可提高退火溫度，降低循環數；若雜帶比目的條帶大，可縮短延伸時間、降低循環數。

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