BiomarkerScript III RT Master Mix for qPCR (One-Step gDNA Remover)
目錄:RK02013
規格:100?RXN (20 μL/RXN)
運輸方式:干冰運輸。
保存方式:-20?℃避光保存,本產品避免反復凍融。
百邁客在BiomarkerScript II Reverse Transcriptase(目錄號:RK02002)基礎上,開發出來的一款高效、快捷的cDNA一鏈合成預混液–BiomarkerScript III RT Master Mix for qPCR (One-Step gDNA Remover)。試劑盒中含有的第三代逆轉錄酶,RNase H活性明顯降低,增強了與模板RNA的親和力;試劑盒中的gDNA?Remover組分,可快速去除gDNA污染,且具有熱敏性,在高溫條件下會快速失活,從而保證了cDNA的完整性。
RNase H活性明顯降低,增強了與模板RNA的親和力,逆轉錄效率高于二代產品。
試劑盒中的gDNA Remover Mix,可高效去除RNA模板中殘留的基因組 DNA污染,保證后續定量結果更加可靠。
10 pg~1 μg總RNA均可擴增;且保證第一鏈cDNA合成效率和成功率。
反應溫度高達55 °C,適合具有復雜二級結構(或GC含量高)的RNA模板的逆轉錄。
均以小鼠肝臟RNA為模板,設置不同的濃度梯度:1 μg、100 ng、10 ng、1 ng、100 pg、10 pg進行反轉,然后取相同體積的cDNA進行qPCR實驗。發現:從10 pg~1 μg總RNA起始量均可反轉成cDNA。
圖1:將小鼠肝臟RNA梯度稀釋 1μg、100ng、10ng、1ng、100pg、10pg進行反轉,然后取相同體積的cDNA,進行qPCR實驗。結論:從10 pg~1 μg總RNA起始量均可反轉成cDNA。
分別加和不加gDNA Remover?處理樣本,后續進行反轉定量。
圖2:取濃度為50 ng的DNA樣本,分別加和不加gDNA Remover處理,后續進行反轉定量。實驗組:加gDNA Remover處理(藍色);對照組:未加gDNA Remover處理(橘色)。結論:加入gDNA Remover的可有效清除gDNA污染。
圖3:取不同濃度的DNA(10、100、200、500?ng),然后直接加gDNA Remover Mix,37?°C加熱5?min,進行凝膠電泳。結論:試劑盒清除gDNA污染效果顯著,0~500 ng的DNA均可以完全清除。